微小RNA(miRNAs)是一种高度保守的小片段非编码RNA,能够通过促进信使RNA(mRNAs)的降解或抑制其翻译,从而调控基因表达。在人类中,大约已发现2,500种miRNA,它们在细胞分化、增殖和凋亡等重要生物过程中发挥着核心作用。miRNA的表达变化常与病理状态及恶性肿瘤密切相关,这使得miRNA成为具有重要价值的诊断生物标志物以及潜在的治疗靶点。因此,miRNA检测技术在临床诊断中的重要性日益提升,为疾病的早期检测、个性化治疗和改善患者预后提供了新希望。
miRNA的生物合成涉及多个步骤。首先,孤立的初级转录产物pri-miRNA在细胞核中被Drosha酶切割,形成前体miRNA(pre-miRNA)。随后,pre-miRNA被转运到细胞质,在那里经过Dicer酶的加工,生成成熟miRNA。成熟的miRNA会被纳入RNA诱导沉默复合体(RISC),并引导至目标mRNA分子。一旦结合,miRNA便会降解mRNA或抑制其翻译,从而在转录后阶段对基因表达进行调控。准确且灵敏地检测miRNA是其在诊断应用中的关键。
目前常用的miRNA检测方法包括:1. Northern Blot分析:通过凝胶电泳分离RNA分子,再利用标记探针进行杂交检测特定miRNA;2. 定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR):对miRNA进行逆转录为cDNA,再使用特定引物进行定量扩增;3. 微阵列分析:将miRNA与固定在微阵列平台上的互补探针杂交,同时分析多种miRNA;4. 下一代测序(NGS):经过miRNA特异性接头连接和扩增,对miRNA库进行高通量测序;5. 原位杂交(ISH):通过标记探针在组织切片中检测miRNA,以观察miRNA在组织中的空间分布。
miRNAs在疾病诊断、预后及治疗反应方面具有极大的潜力。由于它们在血液、唾液和尿液等体液中的稳定性,miRNAs成为非侵入性诊断测试的理想候选者。此外,miRNAs通常在组织中呈现特异的异常表达模式,使其适合用于特定疾病或癌症的诊断。例如,循环中的miR-21和miR-155正在被研究作为乳腺癌、肺癌及结直肠癌等癌症的生物标志物,这些miRNAs可在血液样本中检测,有助于早期诊断及治疗效果监测。在心血管疾病方面,miR-208和miR-499在心肌梗塞期间上调,成为早期标志物。脑脊液和血液中的miRNAs也在被研究用于神经退行性疾病,提供了早期诊断和病程监测的新机遇。
除了体液检测,原位杂交(ISH)则能在组织样本中直接观察miRNAs,从而明确识别组织特异性的表达模式。例如,ISH能够精确定位乳腺癌中miR-126的异常表达,有助于预测疾病的发展趋势及治疗反应。然而,尽管miRNAs作为生物标志物的应用潜力巨大,仍面临若干挑战,需要标准化检测和定量程序,以降低因样本变异及技术因素造成的假阳性和假阴性结果。尽管如此,基于miRNA的生物标志物在改善诊断、预后和治疗反应方面仍展现出显著潜力,因此需要进一步研究以深入理解并克服其限制。
在这个快速发展的生物医疗领域,尊龙凯时-人生就是博致力于推动与miRNA相关的创新检测技术,为早期诊断和精准治疗提供更优质的解决方案,为健康事业贡献力量。