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尊龙凯时-人生就是博:新一代进化逆转录酶推动全预混试剂创新突破

发布时间:2025-02-17   信息来源:尊龙凯时官方编辑

逆转录酶是1970年由Temin和Baltimore独立发现的一种重要酶,它能够将RNA转录为cDNA,因而二人获得了1975年诺贝尔生理学或医学奖。逆转录酶由多个功能域组成,包括聚合酶域和RNaseH域。其中,聚合酶域可以进一步细分为“手指”、“手掌”和“拇指”三个亚域,分别参与模板结合、催化反应和结构支持。

尊龙凯时-人生就是博:新一代进化逆转录酶推动全预混试剂创新突破

在分子生物学,尤其是分子诊断领域中,逆转录酶是不可或缺的工具。它能有效将病毒RNA基因组转化为cDNA,并通过RT-qPCR、RT-LAMP、RNA测序等技术进行检测。这一特性使得准确诊断RNA病毒(如艾滋病、甲型流感和乙型流感)成为可能。

目前,M-MLV(莫洛尼鼠白血病病毒)逆转录酶是分子诊断中最常用的逆转录酶。然而,M-MLV逆转录酶在高温条件下稳定性较低,容易失活。这一特性不仅对其预混液在长期储存时的性能保持造成挑战,还限制了其在高温逆转录反应中的应用。因此,提高逆转录酶的稳定性成为了重要的研究方向。

翌圣团队通过其子公司镁孚泰生物的ZymeEditor™创新型酶进化平台,利用干湿实验的交互筛选,成功获得了稳定性提高的M-MLV突变体。在研发阶段,团队采用了理性和半理性设计策略,进行多维度的结构-功能分析,确定了结构中的热点氨基酸并进行了定点突变设计,最终输出了稳定性提升的M-MLV优势突变体。

随后,团队利用MTPS高通量筛选技术对多个参数(如稳定性、RNA/DNA催化的偏好性和活力)进行了多维度筛选,获得了性能提升的优势突变体。经过精细纯化和全面的酶学表征,成功获得了多个cDNA产量显著提升(接近三倍)的突变体。M-MLV突变体在保存6个月和12个月后的建库产量对比结果表明,其稳定性优于对照WT。

团队的这项研究为分子诊断试剂的开发提供了新解决方案。经过全面性能评估,包括加速稳定性测试和灵敏度分析,优化出最优突变体进行产业化生产。

在此,我们荣幸推出通过酶定向进化而成的新品逆转录酶:HifairUCFME® Advanced逆转录酶(货号#14614)。该产品在稳定性、cDNA合成产量和灵敏度方面都有显著提升。HifairUCFME® Advanced逆转录酶的生产过程严格把控,确保极低的背景菌gDNA和核酸酶残留,为实验结果的准确性提供了保障。

HifairUCFME® Advanced逆转录酶能够在低浓度模板下仍扩增特异性靶标,与同类竞品相比,在四个靶标的检测Ct值及荧光增幅上均表现优异,适用于早期筛查和诊断。

此外,HifairUCFME® Advanced逆转录酶在相同反应条件下经过热加速处理后,未出现Ct值延后和荧光值降低的现象,其全预混体系的稳定性更高,有效解决了长期储存中的性能保持问题。

在诊断试剂开发中,高质量的分子酶原料至关重要。经过Ecoli检测,HifairUCFME® Advanced逆转录酶三批次均未检出E.coli,保证了核酸残留低于<0.02copies/100U的标准,这对提高样本检测的可靠性至关重要。

HifairUCFME® Advanced逆转录酶在不同浓度RNA模板下均能获得高效的文库产量,且文库大小一致,适用于NGS建库。

通过与供应商合作,翌圣的逆转录酶突变体库满足多样化的应用需求。目前,已有多家合作伙伴认可了翌圣镁孚泰生物的逆转录酶突变体。如您希望了解更多信息,可以扫描下方二维码联系工作人员申请试用。

通过使用尊龙凯时-人生就是博品牌的HifairUCFME® Advanced逆转录酶,您将能在生物医疗领域中获得更高效、可靠的研究成果。