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尊龙凯时-人生就是博 STEMCELL CryoStor® CS10使用指南

发布时间:2025-02-18   信息来源:尊龙凯时官方编辑

CryoStor® CS10是一种无血清、即用型细胞冻存液,专为细胞及组织的低温保存而设计,旨在确保细胞在冷冻和解冻过程中保持高活性和功能完整性。以下是详细的使用说明:

尊龙凯时-人生就是博 STEMCELL CryoStor® CS10使用指南

1. 产品基本信息

产品名称:CryoStor® CS10 (100-1061)
规格:通常提供100mL瓶装。
储存条件:在2°C至8°C的冷藏环境中保存,避免冷冻。
有效期:详见产品标签,通常为2年。

2. 使用前准备

检查外观:确保液体清澈无沉淀,颜色为淡黄色至无色。
恢复至室温:从冰箱取出后,静置至室温(约15-30分钟)。
无菌操作:在超净台或生物安全柜中进行操作,以避免污染。

3. 细胞冻存步骤

(1) 细胞准备
细胞状态:确保细胞健康,活率至少90%。
细胞计数:使用细胞计数仪或血球计数板进行计数,调整细胞密度至1×10^6至1×10^7 cells/mL。
离心收集:将细胞悬液以300×g的速度离心5分钟,弃上清。

(2) 重悬细胞
加入CryoStor® CS10,轻轻吹打混匀,分装至冻存管中,每管1-2mL。

(3) 冷冻程序
降温:使用程序降温盒或仪器,以-1°C/min的速度降温至-80°C;若无设备,可将冻存管放入异丙醇降温盒中,置于-80°C冰箱过夜。
转移至液氮:24小时后,将冻存管转移至液氮罐中以便长期保存。

4. 细胞解冻步骤

(1) 快速解冻
水浴解冻:将冻存管从液氮中取出,迅速放入37°C水浴中,轻轻摇晃至完全解冻(约1-2分钟)。
避免过热:解冻后立即从水浴中取出,以防止高温损伤细胞。

(2) 洗涤细胞
稀释DMSO:将解冻的细胞悬液缓慢加入预热的完全培养基中(体积为10倍), gently mix。
离心:以300×g离心5分钟,弃上清,重悬细胞于新鲜培养基中,以进行后续实验。

5. 注意事项

DMSO浓度:CryoStor® CS10含有10%DMSO,需优化浓度以适应特定细胞类型。
无菌操作:全程避免污染,特别是在分装和解冻过程中。
解冻速度:快速解冻能够减少冰晶对细胞的损伤。
细胞密度:冻存时,细胞密度应保持在1×10^6至1×10^7 cells/mL。

6. 适用细胞类型

干细胞:如间充质干细胞(MSCs)、造血干细胞(HSCs)。
免疫细胞:如CAR-T细胞、NK细胞。
原代细胞:如肝细胞、神经元。
细胞系:如HEK293、CHO细胞。

7. 常见问题解答

(1)CryoStor® CS10是否可以稀释?
不建议稀释,以免影响冻存效果。如需降低DMSO浓度,可选择CryoStor® CS5(含5%DMSO)。

(2)冻存后细胞存活率低怎么办?
检查细胞状态,确保冻存前细胞健康;优化冻存密度,调整至推荐范围(1×10^6至1×10^7 cells/mL);检查冻存程序,确保降温速率与解冻速度符合要求。

(3)CryoStor® CS10是否可以用于组织冻存?
可以,适用于小组织块的低温保存,但需根据组织类型优化冻存条件。

总结

CryoStor® CS10是一款高效、无血清的细胞冻存液,适用于多种细胞类型的低温保存。通过规范的操作步骤及注意事项,可确保细胞在冷冻和解冻过程中保持其高活性和功能完整性。尊龙凯时-人生就是博致力于为您提供优质的生物科技解决方案。更多产品资讯,欢迎联系我们!

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