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尊龙凯时-人生就是博 STEMCELL CryoStor® CS10 产品使用指南

发布时间:2025-02-23   信息来源:尊龙凯时官方编辑

尊龙凯时-人生就是博推出的CryoStor®CS10是一款无血清、即用型细胞冻存液,旨在实现细胞和组织的低温保存,确保细胞在冷冻和解冻过程中保持其高活性与功能完整性。以下是详细的使用指南:

尊龙凯时-人生就是博 STEMCELL CryoStor® CS10 产品使用指南

1. 产品基本信息

产品名称:CryoStor®CS10(100-1061)

规格:通常提供100mL瓶装

储存条件:应在2°C至8°C冷藏保存,避免冷冻。

有效期:详见产品标签,通常为2年。

2. 使用前准备

检查外观:确保液体清澈无沉淀,颜色为淡黄色至无色。

恢复至室温:从冰箱取出后,静置至室温(约15-30分钟)。

无菌操作:在超净台或生物安全柜中进行,避免污染。

3. 细胞冻存步骤

(1)细胞准备

细胞状态:确保细胞健康,活率不低于90%。

细胞计数:使用细胞计数仪或血球计数板,调整细胞密度至1×10^6至1×10^7 cells/mL。

离心收集:将细胞悬液以300×g离心5分钟,弃上清。

(2)重悬细胞

加入CryoStor®CS10:根据细胞沉淀量,加入适量CryoStor®CS10,轻轻混匀。

分装:将细胞悬液分装至冻存管中,每管1-2mL。

(3)冷冻程序

降温:使用程序降温盒或程序降温仪,以-1°C/min的速率降温至-80°C;若无程序降温设备,可将冻存管放入异丙醇降温盒,置于-80°C冰箱过夜。

转移至液氮:24小时后,将冻存管转移至液氮罐中进行长期保存。

4. 细胞解冻步骤

(1)快速解冻

水浴解冻:将冻存管从液氮中取出,迅速放入37°C水浴中,轻轻摇晃至完全解冻(约1-2分钟)。

避免过热:解冻后立即从水浴中取出,避免高温损伤细胞。

(2)洗涤细胞

稀释DMSO:将解冻的细胞悬液缓慢加入预热的完全培养基中(如10倍体积),轻轻混匀。

离心:以300×g离心5分钟,弃上清。

重悬:用新鲜培养基重悬细胞,进行后续培养或实验。

5. 注意事项

  • DMSO浓度:CryoStor®CS10含10%DMSO,部分细胞可能对DMSO敏感,需根据需要优化浓度。
  • 无菌操作:全程避免污染,尤其是在分装和解冻步骤。
  • 解冻速度:快速解冻以减少冰晶损伤。
  • 细胞密度:冻存时细胞密度宜在1×10^6至1×10^7 cells/mL之间。

6. 适用细胞类型

干细胞:如间充质干细胞(MSCs)、造血干细胞(HSCs)。

免疫细胞:如CAR-T细胞、NK细胞。

原代细胞:如肝细胞、神经元。

细胞系:如HEK293、CHO细胞。

7. 常见问题解答

(1)CryoStor®CS10是否可以稀释?不建议稀释,以免影响冻存效果。如需降低DMSO浓度,可选择CryoStor®CS5(含5%DMSO)。

(2)冻存后细胞存活率低怎么办?检查细胞状态,确保冻存前细胞健康,并优化冻存密度至推荐范围(1×10^6至1×10^7 cells/mL)。

(3)CryoStor®CS10是否可以用于组织冻存?可以,适用于小组织块的低温保存,但需根据组织类型优化冻存条件。

总结:CryoStor®CS10是一款高效、无血清的细胞冻存液,适用于多种细胞类型的低温保存。通过规范的操作步骤及注意事项,能够确保细胞在冷冻和解冻过程中的高活性和功能完整性。更多关于尊龙凯时-人生就是博的产品信息,请随时联系我们!