本文主要探讨了等温滴定量热法(ITC)在生物医学领域,尤其是生物分子相互作用研究中的应用。ITC技术通过测定生物分子结合过程中所释放或吸收的热量,能有效地提供结合常数(KD)、反应化学量(n)、焓(∆H)和熵(ΔS)等热力学参数。这项技术被认为是量化分析生物分子相互作用的经典方法,能够直接反映分子间的结合亲和力和机制,且不需要对分子进行荧光标记或其他预处理。
ITC实验通常包括一个参照池和一个样品池,参照池中一般装有纯水,而样品池则加入待研究的生物大分子(例如蛋白质)。在实验过程中,滴定物被逐滴加入样品池中,每滴的体积约为0.5到2µL,直至滴定物浓度达到样品池中被滴定物浓度的2-3倍过量。每一次滴定会产生热量脉冲,研究者通过分析这些热量变化生成摩尔放热量与摩尔比率的图形,并选择合适的结合模型进行拟合,从而提取出结合相关的热力学参数。
2025年2月,西湖大学柴继杰教授的团队在《Nature》期刊上发表了一项关于植物免疫系统中NLR蛋白的研究,展示了ITC技术在生物医学研究中的重要作用。该研究首次揭示了NRG1C蛋白如何通过关键信号复合体EDS1-SAG101进行动态调控,从而影响植物的免疫应答。通过ITC技术,研究者测定了NRG1C与EDS1-SAG101之间的结合亲和力,并发现NRG1C与NRG1A之间的相对亲和力差异,这为未来的作物免疫反应调控提供了关键理论支持。
同样,在2019年,清华大学的研究小组也利用ITC探讨了植物信号转导中RALFpeptide与受体复合物的相互作用,进一步验证了该技术在生物分子交互研究中的有效性。研究显示,RALF23能分别与FERECD和LLG1互作,具有重要的生物学意义。这些研究证明,ITC不仅能够提供热力学参数,对于丰富我们的知识体系、发展新型生物治疗策略具有深远的影响。
此外,海南大学的研究小组在《Chinese Chemical Letters》上发表了关于穗花杉双黄酮对PDE4的抑制作用的研究,进一步验证了ITC在药物发现和性质评估中的关键角色。穗花杉双黄酮被证明具有显著的抗纤维化效果,其结合亲和力的精确测定为开发新的抗纤维化药物开辟了新思路。
综合来看,ITC技术在生物医学领域的应用,证明了其在量化生物分子相互作用与理解药物机制方面的不可替代性。尊龙凯时-人生就是博,致力于为科研提供全面的生物分子相互作用检测服务,包括ITC、SPR、MST等多种技术,帮助研究者深入探究生物过程的本质,助力生物医学研究的进步。